Устная часть по русскому егэ 2018: Минобрнауки: устная часть ЕГЭ продолжит развиваться

Прохождение итогового собеседования с февраля 2019 года будет общеобязательным, и при получении незачёта к ОГЭ не допустят. Аналогично в 11-м классе: чтобы получить допуск к ЕГЭ, нужно написать итоговое сочинение.

Итоговое собеседование будет проходить в виде беседы с преподавателем (а не с компьютером).

Руководитель федеральной комиссии разработчиков КИМ ЕГЭ и ОГЭ по русскому языку Ирина Цыбулько рассказала, что устный экзамен будет нацелен на проверку навыков спонтанной речи – на подготовку участнику будет даваться около минуты.

Модель итогового собеседования по русскому языку включает следующие типы заданий:
1) чтение текста вслух;
2) пересказ текста с привлечением дополнительной информации;
3) монологическое высказывание по одной из выбранных тем;
4) диалог с экзаменатором-собеседником.

По словам И. Цыбулько, все тексты для чтения, которые будут предложены участникам собеседования, – это тексты о выдающихся людях России, таких как первый космонавт Юрий Гагарин, знаменитый хирург Николай Пирогов, наши современники Доктор Лиза (Елизавета Глинка) и доктор из Красноярска, который в сложных условиях провёл операцию и спас жизнь ребёнку.

На выполнение работы каждому участнику будет отводиться около 15 минут. В процессе проведения собеседования будет вестись аудио-
и видеозапись.

Оценка выполнения заданий работы будет осуществляться экспертом непосредственно в процессе ответа по специально разработанным критериям с учётом соблюдения норм современного русского литературного языка.

Планируется, что итоговое собеседование выпускники 9 классов будет проходить в своих школах. Оцениваться оно будет по системе «зачёт»/«незачёт». Для получения «зачёта» нужно будет набрать 8 баллов из 14.

Итоговое собеседование будет проведено повсеместно в 2018 году, но в виде апробации. Это означает, что его результаты не будут влиять на допуск учащихся к ОГЭ в 2018 году. Однако уже в феврале 2019 года собеседование будет проведено во всех регионах и от его результатов будет зависеть допуск к экзаменам.

Максимальный балл за выполнение всей работы – 19. «Зачёт» выставляется, если набрано не менее 10 баллов.

КРАТКИЙ ИТОГ:
● Для допуска к ОГЭ с 2019 года нужно будет пройти итоговое собеседование.
● 14-16 февраля будет проведена апробация устной части по русскому языку. Также она будет проведена 13 и 16 апреля 2018 года во всех регионах. Результаты апробации не будут влиять на допуск к ОГЭ.
● Во время ответа ученика будет оценивать преподаватель. Для получения «зачёта» нужно набрать 10 баллов из 19.
● Итоговое собеседование будет длиться около 15 минут.
● Итоговое собеседование будет состоять из 4-х частей: чтение, пересказ, монолог и диалог.
● У ученика будут проверять навык спонтанной речи, поэтому времени на подготовку будет немного – всего 1 минута.

● Как сдать Итоговое собеседование?
● Видеоуроки
● Курс по подготовке к Итоговому собеседованию

%PDF-1.4 % 386 0 объект > эндообъект внешняя ссылка 386 186 0000000016 00000 н 0000004851 00000 н 0000005026 00000 н 0000006004 00000 н 0000006073 00000 н 0000006164 00000 н 0000006336 00000 н 0000006413 00000 н 0000006527 00000 н 0000006639 00000 н 0000006753 00000 н 0000006877 00000 н 0000007023 00000 н 0000007169 00000 н 0000011288 00000 н 0000014725 00000 н 0000015148 00000 н 0000015786 00000 н 0000016159 00000 н 0000016718 00000 н 0000016837 00000 н 0000016938 00000 н 0000017457 00000 н 0000018083 00000 н 0000018454 00000 н 0000018890 00000 н 0000023185 00000 н 0000027514 00000 н 0000027656 00000 н 0000027834 00000 н 0000028286 00000 н 0000034091 00000 н 0000039910 00000 н 0000045011 00000 н 0000049631 00000 н 0000054802 00000 н 0000057629 00000 н 0000057873 00000 н 0000057956 00000 н 0000058011 00000 н 0000058096 00000 н 0000058185 00000 н 0000058276 00000 н 0000058589 00000 н 0000058627 00000 н 0000058710 00000 н 0000058783 00000 н 0000059087 00000 н 0000059266 00000 н 0000059324 00000 н 0000059381 00000 н 0000059505 00000 н 0000059583 00000 н 0000059658 00000 н 0000059733 00000 н 0000059850 00000 н 0000059999 00000 н 0000060326 00000 н 0000060381 00000 н 0000060497 00000 н 0000060621 00000 н 0000060747 00000 н 0000060871 00000 н 0000060995 00000 н 0000061111 00000 н 0000061181 00000 н 0000061266 00000 н 0000064469 00000 н 0000064757 00000 н 0000064930 00000 н 0000064957 00000 н 0000065257 00000 н 0000067701 00000 н 0000068066 00000 н 0000068488 00000 н 0000069829 00000 н 0000070149 00000 н 0000070505 00000 н 0000071153 00000 н 0000071436 00000 н 0000073468 00000 н 0000073814 00000 н 0000110790 00000 н 0000110829 00000 н 0000110851 00000 н 0000156612 00000 н 0000156651 00000 н 0000193134 00000 н 0000193173 00000 н 0000193297 00000 н 0000193430 00000 н 0000193551 00000 н 0000193697 00000 н 0000193924 00000 н 0000194151 00000 н 0000194272 00000 н 0000194418 00000 н 0000194673 00000 н 0000195101 00000 н 0000195265 00000 н 0000195411 00000 н 0000195625 00000 н 0000195933 00000 н 0000196146 00000 н 0000196288 00000 н 0000196434 00000 н 0000196846 00000 н 0000197258 00000 н 0000197513 00000 н 0000197692 00000 н 0000197838 00000 н 0000198254 00000 н 0000198664 00000 н 0000198785 00000 н 0000198934 00000 н 0000199383 00000 н 0000199795 00000 н 0000199916 00000 н 0000200065 00000 н 0000200313 00000 н 0000200781 00000 н 0000201029 00000 н 0000201175 00000 н 0000201324 00000 н 0000201402 00000 н 0000230337 00000 н 0000230415 00000 н 0000230781 00000 н 0000230859 00000 н 0000230972 00000 н 0000231330 00000 н 0000231408 00000 н 0000231534 00000 н 0000231612 00000 н 0000232032 00000 н 0000232110 00000 н 0000232532 00000 н 0000232610 00000 н 0000233035 00000 н 0000233353 00000 н 0000233431 00000 н 0000274383 00000 н 0000274461 00000 н 0000274819 00000 н 0000274897 00000 н 0000275128 00000 н 0000275211 00000 н 0000275266 00000 н 0000275329 00000 н 0000275454 00000 н 0000275529 00000 н 0000275613 00000 н 0000275734 00000 н 0000275888 00000 н 0000275966 00000 н 0000276024 00000 н 0000276073 00000 н 0000276108 00000 н 0000276186 00000 н 0000279430 00000 н 0000279755 00000 н 0000279821 00000 н 0000279937 00000 н 0000283181 00000 н 0000283856 00000 н 0000284215 00000 н 0000284744 00000 н 0000284822 00000 н 0000285168 00000 н 0000285246 00000 н 0000285359 00000 н 0000285437 00000 н 0000285923 00000 н 0000285974 00000 н 0000286009 00000 н 0000286087 00000 н 0000295703 00000 н 0000296027 00000 н 0000296093 00000 н 0000296209 00000 н 0000305825 00000 н 0000324753 00000 н 0000325111 00000 н 0000325600 00000 н 0000004666 00000 н 0000004097 00000 н трейлер ]/Предыдущая 383853/XRefStm 4666>> startxref 0 %%EOF 571 0 объект >поток h|QMHTQOas쑅LJDocP-V4. Ĉ 1`$(k#-3 u.YKiQvws9r

Клинические доказательства того, что пандемия с 1889 по 1891 год, обычно называемая русским гриппом, могла быть более ранней пандемией коронавируса — Brüssow — 2021 — Microbial Biotechnology

Теперь мы подошли к критический вопрос, соответствуют ли клинические симптомы, зарегистрированные для пациентов с русским гриппом, вирусной инфекции гриппа или межвидовой инфекции коровьим коронавирусом или другим инфекционным агентом.Чтобы ответить на этот вопрос, мы имеем привилегированное положение, чтобы иметь два всесторонних современных отчета из Великобритании и Германии в связи с пандемией русского гриппа.Британский отчет Парсонса (см. ниже) поднял этот вопрос при обсуждении альтернативных возбудителей, таких как лихорадка денге, как потенциального возбудителя, но отверг эту возможность.

Британский отчет Парсонса

В 1891 г. в Лондоне появился 344-страничный «Отчет об эпидемии гриппа 1889–1890 гг., подготовленный доктором Парсонсом с предисловием медицинского работника Совета местного самоуправления», в котором резюмировались мировые эпидемиологические данные о пандемии (Report on the the Эпидемия гриппа 1889-90 гг. — Великобритания.Совет местного самоуправления, Генри Франклин Парсонс — Google Книги; Дальнейший отчет и документы об эпидемии гриппа, 1889–1892 гг.: С… — Великобритания. Совет местного самоуправления — Google Книги). Также представлены данные о симптомах, наблюдаемых у больных из разных учреждений Англии.

Больница сообщает: Доктор Лоу из больницы Святого Томаса в Лондоне написал: «Вторжение внезапное; … с острыми болями в спине … часто сопровождающимися головокружением и тошнотой, а иногда и фактической рвотой желчью.Боли в конечностях и общее ощущение ноющей боли во всем теле; лобная головная боль особой тяжести; боли в глазных яблоках, усиливающиеся при малейшем движении глаз; дрожь; общее чувство тоски и слабости, сильное угнетение духа, … плач; нервное беспокойство; неспособность заснуть, иногда делирий. В ряде случаев наблюдаются катаральные явления… инъецируются глаза; чихание и боль в горле; и носовое кровотечение, отек околоушных и подчелюстных желез, тонзиллит и срыгивание яркой кровью из глотки. Жесткий, сухой кашель приступообразного типа, усиливающийся ночью. …Часто болезненность селезенки. Температура в начале высокая (100°F в легких случаях до 105°F в тяжелых случаях)».

Другой врач отметил: «Главные симптомы — похолодание вдоль спины с ознобом… сильная боль в голове и глазах…; боли в конечностях… даже в пальцах рук и ног; и фебрильная температура, которая в раннем периоде может подняться до 104° или 105°F. Больной чувствует себя чрезмерно больным и угнетенным, склонен страдать от тошноты или недомогания и поноса, по большей части беспокоен, хотя часто сонлив… .больной может выздороветь в течение трех-четырех дней. Он может быть даже настолько легким, что, хотя чувствует себя очень плохо, может заниматься своей обычной работой. … у пациентов дополнительно отмечается некоторая сухость или болезненность в горле или выделения из носа, … сопровождающиеся легким кровотечением. …в то время, когда больной кажется выздоравливающим, его начинают мучить хрипы в груди, кашель и, возможно, небольшая одышка, и вскоре срыгивается слизь…с примесью крови…. Еще одно осложнение – диарея. Еще розеолезная пятнистая сыпь….».

В отчете Парсонса говорится: «Внезапное начало, быстрое развитие лихорадки и сильное и стойкое нервное истощение несоизмеримы с тяжестью других общих или местных симптомов». но в то же время отмечает «склонность к рецидивам и опасным легочным осложнениям». «Катаральные симптомы были менее выражены, что заставило некоторых наблюдателей усомниться в том, что недавняя эпидемия была эпидемией настоящего гриппа».Затем: «наиболее распространенными и неотложными симптомами являются лобная головная боль и боль в глазных яблоках, мышечные боли в различных частях тела и нервное угнетение». «В некоторых случаях наблюдалась сыпь, мало чем отличающаяся от краснухи, главным образом на задней поверхности конечностей».

Отчеты из тюрьмы и приюта: Доктор Коуэн, медицинский работник тюрьмы Пентонвилля, цитируется в отчете: «Инкубационный период: от одного до семи дней. Общий вид: Больной выглядит больным, имеет тусклый сонный вид. Прострация: очень выраженная и общее желание лечь в постель. Головная боль: Очень сильная, начинается в задней части шеи и переходит в сильную лобную головную боль с заглазничными болями. Средняя температура составляет 101 ° F, которая держится всего около 24 часов. Боль: особенно в голове, спине и бедрах. Боль в горле отмечалась в единичных случаях. Диарея в единичных случаях. Осложнения: Бронхит с болью за грудиной, но с очень небольшим количеством мокроты. Сухой отрывистый раздражительный кашель, длящийся около пяти дней.

Затем отчет Парсона продолжается наблюдениями за 70 инфицированными взрослыми пациентами в приюте для душевнобольных в Эдинбурге, опубликованными в Британском медицинском журнале 1 февраля 1890 года. Основными симптомами были: сильная слабость (92%), лобная головная боль (88). %), боль в конечностях (84%), головокружение (81%), потеря аппетита (78%), насморк (выделения из носа, связанные с простудой) (77%), бронхит (77%), тошнота (62%) . Желудочно-кишечные симптомы встречались реже, т.е. рвота (38%) и диарея (25%).

Наблюдения , напоминающие COVID-19: Ряд наблюдений, описанных в отчете Парсонса, больше напоминают характеристики COVID-19, чем характеристики гриппа. Примечательны:

Легкое поражение у подростков: ‘Среди 177 случаев в школе для девочек, описанных в Британском медицинском журнале от 22 февраля 1890 г., основными симптомами были головная боль (98%), слезотечение (96%) и покраснение лица (80%). .Среди 85 мальчиков-подростков лобная головная боль была единственным симптомом, наблюдаемым более чем в 50% случаев».

Дети относительно защищены: словами из отчета Парсонса «Многие считали, что дети не так подвержены заражению гриппом, как взрослые, но большой процент заболевших в некоторых школах и на учебных судах опровергает это мнение. Однако считается общепризнанным, что дети, заразившиеся гриппом, болели не так тяжело, как взрослые, меньше болели и быстрее выздоравливали.

Возраст как фактор риска смертности: «Грипп был болезнью, особенно смертельной для пожилых людей».

Сопутствующая патология как фактор риска смертности: «Приступ гриппа имеет тенденцию вызывать или ускорять летальный исход, если он возникает у пациента, уже страдающего органическим заболеванием сердца, легочной чахоткой (сегодня: туберкулез легких) или эмфизема легких; а также, согласно статистике Dr.Бертильон, диабет или церебральное заболевание. Он также особенно опасен для лиц продвинутого возраста».

Гендерная предвзятость в отношении заболеваемости: «Некоторые медики заявили, что мужчины страдают больше, чем женщины».

Дальние тягачи: «Долговременные пагубные последствия доступа к гриппу в значительной части случаев предполагают, что materies morbi лишь медленно гасится в организме или устраняется из него. Некоторые субъекты испытывают еженедельные приступы или рецидивы в течение многих недель после первичного доступа. Оно может принимать форму сильного нарушения умственных и физических способностей или более выраженную форму головокружения или угнетения сердечной деятельности с общей артериальной релаксацией, требующей обращения в лежачее положение… Рецидивы…часто случаются; они встречались в 9% случаев».

Патология: «локальные явления могут быть результатом мельчайших тромбозов в различных органах тела» и «осложнений, наиболее частыми из которых являются воспалительные состояния органов дыхания, такие как пневмония, бронхит и плеврит, и к этим главным образом обусловлена ​​приписываемая ему смертность.

Мультисистемное заболевание: «Многими наблюдателями были признаны три формы гриппа, а именно: A. Нервная, B. Катаральная, C. Желудочная. Все эти три формы наблюдались в случаях, происходящих вместе под одной крышей, и, очевидно, являются просто разновидностями одной и той же болезни».

Пресимптоматическая передача: «Немецкий наблюдатель предположил, что пациент может быть способен передавать инфекцию, пока еще только на стадии инкубации.Если это так, то это поможет объяснить быстрое распространение болезни».

Периодическое симптоматическое повторное заражение: «В Британском медицинском журнале от 15 февраля 1890 г. зарегистрирован случай, когда у пациента, перенесшего грипп во Франции в декабре 1889 г., случился еще один приступ в Англии в январе 1890 г.»

Отсутствие иммунной защиты от предыдущей эпидемии гриппа: «Людей, живущих в настоящее время, перенесших (грипп) болезнь в 1847 году, конечно, сравнительно немного, но такие люди не были освобождены от нынешней эпидемии.

Британский медицинский журнал сообщает

Пандемия 1889 года хорошо освещалась в современных отчетах, опубликованных в British Medical Journal (Kousoulis and Tsoucalas, 2017). Eade (1891) сообщил о случаях, которые он лечил в Восточной Англии. Некоторые характеристики больше напоминают COVID-19, чем классический грипп. Он наблюдал полиорганное поражение, начиная от дыхательной системы (катар, сухая спастическая астма, бронхит) и заканчивая желудочно-кишечными симптомами (тошнота, рвота, диарея) до выраженных неврологических симптомов.К последним относились психические расстройства, притупление сознания, апатия и поражение чувствительных нервов. Наблюдались поражения кожи, включая алопецию (выпадение волос). Воспаление легких было наиболее частой причиной смерти и поражало очень старых и ранее болевших. Он отметил частые и тяжелые нервные последствия в случаях с 1890 года. Области, серьезно пораженные в 1890 году, почти не пострадали в 1891 году, что предполагает наличие одного агента и развитие коллективного иммунитета. Сообщая о гриппе, случившемся в 1893–1894 гг., тот же британский врач описал заболевание, которое соответствовало классическому гриппу с пиками смертности как у очень молодых, так и у очень старых людей и почти исключительным поражением легких с несколькими другими симптомами и отсутствием неврологических осложнений, подчеркивающих различная природа двух болезней (Eade, 1894). В другом британском отчете подчеркивается сходство эпидемии 1889–1892 гг. с COVID-19, когда отмечается, что «наиболее распространенными обнаруженными последствиями были угнетение нервов, невралгия, головные боли, потеря вкуса и обоняния», а также описываются легочные, кишечные и ревматические формы. часто смешанные. Врачи также наблюдали «особый иммунитет маленьких детей», нетипичный для гриппа (Анонимус, 1892). Сочетание респираторных, желудочно-кишечных и неврологических симптомов также было зарегистрировано в Австралии у пациентов приюта для душевнобольных, где «утомительное выздоровление было почти обычным явлением» во время волны пандемии (Hay, 1892).

Британника запись

Дополнительная информация содержится в статье Британской энциклопедии о гриппе, опубликованной в 1911 г. (1911 Encyclopædia Britannica/Influenza — Wikisource, бесплатная онлайн-библиотека). В то время была придумана фраза «Грипп симулирует другие заболевания» (Клиффорд Олбатт), и сообщалось, что «сердечные приступы были обычным явлением, что привело к идее, что вырабатывается специфический токсин для сердечной мышцы, а также нервный токсин. Во время парижской эпидемии 1890 года количество самоубийств увеличилось на 25%, причем большая часть этого превышения была связана с нервным истощением, вызванным этой болезнью». Меланхолия, связанная с гриппом, встречается в два раза чаще, чем все другие формы безумия, вместе взятые. Другими частыми последствиями являются невралгия, диспепсия, бессонница, слабость или потеря особых ощущений, особенно вкуса и обоняния, боли в животе, боль в горле, ревматизм и мышечная слабость.Наиболее опасным для жизни признаком является, однако, особая предрасположенность больных к воспалению легких».

Немецкий отчет Verein für Innere Medicin

Принимая во внимание, что в 1889 году бактериальная теория инфекционных заболеваний еще не победила теорию миазмов, согласно которой загрязненный воздух, выделяемый из трещин в почве, образовавшихся в результате землетрясений, считался причиной эпидемий, отчет, собранный Немецкая ассоциация внутренней медицины, созданная в 1892 году в Берлине, кажется поразительно современной в своем подходе (Leyden and Guttmann, 1892 https://collections. nlm.nih.gov/catalog/nlm:nlmuid-64820270R-bk). Эта ассоциация разработала анкету, состоящую из 15 тематических областей, касающихся наблюдений за больными во время эпидемии русского гриппа в Германии. Опрос был разослан 20 000 врачей во всех регионах Германии, и 6000 дали подробные ответы, которые затем систематически оценивались подкомитетами этой ассоциации в соответствии с симптомокомплексами. 189-страничный отчет, сопровождаемый многочисленными картами, можно резюмировать следующим образом (перевод с аутентичного текста авторами отмечен знаком «…», пояснительные термины авторами в скобках).

Сердечно-сосудистые исследования: «Поражение сердца, особенно у пожилых людей и лиц с ожирением, может быть опасным для жизни. Многие пациенты сообщают об ощущении сжатия грудной клетки и прекардиальной локализации беспокойства. Неоднократно упоминался перикардит и эндокардит. В качестве осложнений отмечена ревматическая болезнь. Наиболее интересное осложнение затрагивает сосудистое русло, так как ранее этого не наблюдалось при других эпидемиях. В восстановительном периоде часто наблюдались флебиты и тромбозы, встречались даже смертельные случаи синус-тромбоза.Поражали случаи тромбоза артерий».

Респираторные наблюдения: «Почти без исключения наблюдался насморк (ринит), связанный с приступами слезотечения и чихания; носовое кровотечение (кровотечение из носа) было очень частым, как и локальное увеличение лимфатических узлов. Фарингит и тонзиллит часто приводили к ларинготрахеиту, когда чувство раздражения в гортани вызывало кашель. Раздражение спускается из бронхов в мельчайшие бронхиолы.Вначале появляется сухой кашель, который позже достигает кульминации в пароксизме кашля. Часто наблюдается одышка (одышка)».

Пневмония: ‘Эта эпидемия характеризовалась не только высокой частотой пневмонии, наблюдаемой у 5-10% всех инфицированных, но, в частности, крупозной пневмонией (определяемой по фибринозному налету в воздушных везикулах легких). ). Летальность у больных пневмонией была очень высокой и колебалась от 15 до 26%. Смерть наступила от отека легких и паралича сердца. Бронхопневмония началась с озноба и медленного повышения температуры. Пневмонии наиболее часто встречались у лиц пожилого возраста и лиц слабой конституции. У лиц среднего возраста пневмония протекала без лихорадки. Выпот в плевральную полость наблюдался в 12–20% случаев. Важнейшим осложнением был церебральный менингит в фазе реконвалесценции, который не наблюдался ни в одной из предыдущих эпидемий. Сообщалось о сиквелах для людей с сердечными заболеваниями и диабетом.Описаны редкие случаи геморрагических инфарктов легких с эмболическим материалом из вен верхних конечностей. Туберкулез обострился из-за инфекции. Сообщалось о преждевременных родах».

Желудочно-кишечные наблюдения : «ЖК-тракт был поражен почти у всех пациентов, однако более тяжелые желудочно-кишечные симптомы наблюдались только в четверти всех случаев. Нарушение было множественным и могло сохраняться в течение 4 недель, особенно у детей. У 18 % обследованных был поражен только желудок, у 15 % — только кишечник.Потеря аппетита сопровождалась странными изменениями вкусового восприятия. Пациенты сообщали либо о полной потере вкуса, либо о ненормальном вкусовом восприятии, описывающем горькие или гнилостные вкусовые ощущения. Рвота наблюдалась у 34%, диарея — у 34% пациентов, а 15% страдали как рвотой, так и диареей. Оба симптома были связаны с более коротким течением заболевания. В 5% случаев наблюдалось кровоизлияние в слизистую оболочку кишечника».

Неврологические наблюдения : «Выражены невралгические боли и прострация, и у 92% больных преобладают неврологические жалобы.Пациенты отмечали в основном головную боль, реже боль в спине и мышцах. Четверть больных была неспособна возобновить свою обычную деятельность даже без проявления других симптомов болезни. Головокружение, бессонница, обмороки и невралгические боли в области черепно-мозговых нервов (тройничного нерва) отмечались с частотой от 5 до 14% пациентов. Многие сообщали о существенных нарушениях обоняния и вкусовых ощущений. После острой фазы наблюдалось нарушение памяти, интерпретируемое как психоз истощения.Общее истощение после инфекции было частым, и многим больным требовалось несколько недель, чтобы восстановить прежние силы».

Кожа : У половины пациентов наблюдалась незначительная, быстро исчезающая экзантема (кожная сыпь при некоторых вирусных или кокковых инфекциях). Наблюдались петехии (точечные кожные кровотечения) и кровоизлияния в кожу, а кровотечения из слизистой оболочки, особенно из носа, были частыми.

Мультисистемное заболевание : Врачи отметили несколько форм проявления болезни во время пандемии, которые «они выделили как (i) нервную, (ii) респираторную, (iii) желудочную и (iv) ревматическую формы.Они наблюдали в Германии географически четкое представление этих четырех проявлений болезни».

Определение эффективности перорального применения диоксида хлора при лечении COVID-19 — просмотр полного текста

Обзор плана испытаний, этап II фазы проекта

Индикация:

Дополнительное лечение COVID 19

Цель исследования:

Изучить эффективность и переносимость препарата на основе диоксида хлора

Дизайн исследования:

Квазиэкспериментальный клинический случай

Количество ожидаемых пациентов:

20 пациентов.

Основные критерии включения:

Инфекция COVID-19

Вещество или исследуемый препарат:

Диоксид хлора 3000 частей на миллион, вводимый в виде разведения в воде.

Дозировка:

10 см3 диоксида хлора 3000 ppm, разбавленного в одном литре воды, принимать равными дозами в течение 24 часов.

Путь и продолжительность введения лекарства. Лекарство будет приниматься перорально в течение одного месяца.

Основные критерии эффективности:

Оценка по «визуальной аналоговой шкале» (ВАШ), 10-балльной шкале (1 = плохая ВАШ; 10 = оптимальная) оценка пациентами.

Негативизация COVID 19 у пациента.

Критерий допуска:

Побочные реакции Семиологические, клинические и лабораторные исследования ожидаются в начале исследуемого лечения (или на исходном уровне), а также через 7, 15 и 30 дней.

Статистическая оценка:

Эквивалентность основных объективных критериев между группами будет оцениваться подтверждающим образом в конце лечения в одностороннем порядке с помощью SSSP.

Введение CDC (Центры по контролю и профилактике заболеваний) реагируют на вспышку респираторного заболевания, вызванного новым коронавирусом, который был впервые обнаружен в Китае и в настоящее время обнаружен почти в 90 местах по всему миру, в том числе в Соединенных Штатах. Вирус получил название «SARS-CoV-2», а вызывающее его заболевание — «коронавирусная болезнь 2019» (сокращенно «COVID-19»).

Текущая пандемия covid19 — это ситуация, которая: является серьезной, необычной или неожиданной; это имеет последствия для общественного здравоохранения за пределами национальной границы пострадавшего государства; и требует немедленных международных действий.

По той же причине необходимо срочно искать маршруты, которые могут внести что-то новое, желательно быстрое, эффективное и экономичное, что решит или смягчит текущую пандемию.

В этой работе мы будем использовать основы трансляционной медицины, чтобы представить традиционную медицину, исследования и лечение, которые рождаются на территории разнообразных терапевтических возможностей.

ПОСТАНОВКА ЗАДАЧИ

Описание проблемы Covid-19 — инфекционное заболевание, вызываемое вирусом SARS-CoV-2.Впервые он был обнаружен в китайском городе Ухань (провинция Хубэй) в декабре 2019 года. За три месяца он распространился практически по всем странам мира, из-за чего Всемирная организация здравоохранения объявила его пандемией.

Эффективное лечение этого заболевания неизвестно. ВОЗ рекомендует проводить рандомизированные контролируемые испытания с участием добровольцев для проверки эффективности и безопасности некоторых потенциальных методов лечения.

Исходя из этого, мы смотрим на исследовательские процессы, проведенные в прошлом, чтобы провести (первоначальная трансляционная медицина) эти многообещающие и начальные наблюдения в лечении инфекционных заболеваний для лечения ковидных инфекций 19 .

Ограничение проблемы Было сочтено, что исследования, которые действительно могли бы способствовать решению ранее поднятой проблемы, должны быть направлены на разработку лекарственного препарата с терапевтическими возможностями, изученными в прошлом, на основе как традиционных, так и нетрадиционных исследований.

Общие и специальные цели исследования

Общего назначения :

Для определения эффективности перорального применения диоксида хлора при лечении COVID-19

Конкретные цели :

1. Измерение положительного или отрицательного результата на COVID-19 у пациентов, получавших лечение диоксидом хлора.
2. Определите клиническое улучшение по визуальной шкале ВАШ.

Ожидаемые результаты:

Ожидается снижение заболеваемости и особенно смертности от вирусной инфекции COVID за счет лечения диоксидом хлора.

Исследовательский вопрос

Таким образом, начиная с разграничения проблемы, ставится следующий исследовательский вопрос:

Может ли использование диоксида хлора изменить заболеваемость и смертность у пациентов, инфицированных COVID-19?

ОБОСНОВАНИЕ Учитывая лавину смертей, вызванных коронавирусом, при отсутствии действительно эффективного лечения, мы разработали протокол борьбы с COVID-инфекцией, особенно у госпитализированных пациентов и в отделении интенсивной терапии, с целью попытаться снизить заболеваемость и смертность. вирусной инфекции.

, мы рекомендуем дополнительный экспериментально-исследовательский подход, направленный на снижение деструктивных и фиброзных последствий процесса, а также бури. лейкоцитарный и антифосфолипидный синдром, встречающийся во многих случаях, а в других случаях предотвращающий, сокращая сроки выздоровления больных.

Современное международное исследование методов лечения коронавируса • Вакцины Изучаются три стратегии вакцинации. Во-первых, исследователи стремятся создать полную вирусную вакцину.T. Вторая стратегия, субъединичные вакцины, направлена ​​на создание вакцины, повышающей чувствительность иммунной системы к определенным субъединицам вируса. . Третьей стратегией являются вакцины на основе нуклеиновых кислот (ДНК- или РНК-вакцины, новый метод создания вакцины). Экспериментальные вакцины любой из этих стратегий должны быть проверены на безопасность и эффективность. Вероятно, потребуется от нескольких месяцев до года, чтобы создать действительно эффективную вакцину. Мутагенность вируса затрудняет это.

Противовирусные препараты 23 января компания Gilead Sciences связалась с исследователями и врачами в США и Китае по поводу продолжающейся вспышки уханьского коронавируса и потенциального использования Ремдесивира в качестве экспериментального лечения.

В конце января Минздрав России определил три препарата для взрослых, которые могут помочь в лечении этого заболевания. Это рибавирин, лопинавир/ритонавир и интерферон бета-1b. Эти препараты обычно используются для лечения гепатита С, ВИЧ-инфекции и рассеянного склероза соответственно. Министерство предоставило российским больницам описания и руководства по механизму действия лечения и рекомендуемым дозам. В феврале Китай начал использовать триазавирин, препарат, разработанный в России в 2014 году, с целью проверки его эффективности в борьбе с болезнью.Этот препарат создан в Уральском федеральном университете в Екатеринбурге для лечения гриппа H5N1 (птичьего гриппа). Он был использован против COVID-19 из-за сходства между двумя заболеваниями. 18 марта в статье сообщается, что лечение лопинавиром/ритонавиром дало отрицательный результат в клинических испытаниях с участием 199 пациентов в Китае. Нет никаких преимуществ.

Китайские исследователи обнаружили, что арбидол, противовирусный препарат, используемый для лечения гриппа, можно комбинировать с дарунавиром, лекарством, используемым для лечения ВИЧ, для лечения пациентов с коронавирусом.

Хлорохина фосфат продемонстрировал очевидную эффективность при лечении пневмонии, связанной с COVID-19. В клинических испытаниях с участием 100 пациентов было обнаружено, что он превосходит контрольное лечение в отношении замедления обострения пневмонии, улучшения результатов визуализации легких, способствует негативной конверсии вируса и сокращает время болезни. хлорохин может предотвратить атаку гема orf1ab, ORF3a и ORF10 с образованием порфирина и в некоторой степени ингибировать связывание ORF8 и поверхностных гликопротеинов с порфиринами.

Национальный центр развития биотехнологии Китая заявил 17 марта, что противовирусный препарат Фавипиравир, ингибитор РНК-полимеразы, показал положительные результаты в исследовании случай-контроль 80 пациентов в Народной больнице № 3 Шэньчжэня. в течение более короткого периода времени по сравнению с контрольной группой, и рекомендует включить его в лечение.

Гидроксихлорохин, менее токсичное производное хлорохина, будет более эффективно ингибировать инфекцию SARS-CoV-2 in vitro.16 марта 2020 года ведущий французский орган и советник правительства Франции по COVID-19, профессор Дидье Рауль из Университетской больницы Института инфекционных заболеваний (IHU-Méditerranée инфекция) в Марселе (Буш-дю-Рон, Прованс-Альпы- Côte d’Azur) объявил, что исследование с участием 24 пациентов с юго-востока Франции показало, что хлорохин является эффективным средством лечения COVID-19. Этим пациентам ежедневно в течение 10 дней вводили 600 мг гидроксихлорохина (торговая марка Plaquenil).

• Против цитокинового шторма Тоцилизумаб был включен в рекомендации по лечению Национальной комиссией здравоохранения Китая после завершения небольшого исследования. В сочетании с анализом сывороточного ферритина крови для выявления цитокиновых бурь предполагается противодействовать таким явлениям, которые, как полагают, являются причиной смерти у некоторых пораженных лиц. Антагонист рецептора интерлейкина-6 был одобрен FDA для лечения синдрома высвобождения цитокинов, вызванного другой причиной, терапией CAR T-клетками, в 2017 году.
• Пассивная терапия антителами Исследуется использование донорской крови здоровых людей, которые уже выздоровели от COVID-19, и эта стратегия также была протестирована на атипичную пневмонию, предшественницу COVID-19. Механизм действия заключается в том, что антитела, естественным образом вырабатываемые в иммунной системе тех, кто уже выздоровел, передаются людям, которые в них нуждаются, с помощью формы иммунизации, не основанной на вакцинах.

Vir Biotechnology, базирующаяся в Сан-Франциско, оценивает эффективность ранее идентифицированных моноклональных антител (мАт) против вируса.

Исследователи из Утрехтского университета и Erasmus MC объявили об обнаружении человеческого моноклонального антитела, блокирующего инфекцию SARS-CoV-2.

Был проведен систематический поиск использования диоксида хлора в международной библиографии для проиндексированной литературы. Наиболее важные выводы в упомянутой выше библиографии заключаются в том, что они сосредоточены на дезинфекции помещений, использовании в гигиене полости рта, использовании в агрономии и на этапе 1 исследование на крысах с инфекцией, вызванной гриппом А, в двух группах, одну из которых лечили диоксидом хлора, а другую — без диоксида хлора.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ОСНОВА ДИОКСИДА ХЛОРА И ОСНОВЫ ЕГО ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ

Терапевтическое действие диоксида хлора обусловлено его селективностью в отношении рН. Это означает, что эта молекула диссоциирует и выделяет кислород, когда вступает в контакт с другой кислотой. При реакции он превращается в хлорид натрия (поваренную соль) и при этом выделяет кислород, который в свою очередь окисляет (сжигает) болезнетворные микроорганизмы (вредные микроорганизмы) кислого рН, превращая их в щелочные оксиды («золу»).Следовательно, когда диоксид хлора диссоциирует, он высвобождает кислород в кровь, как и эритроциты (эритроциты) по тому же принципу (известному как эффект Бора), который должен быть селективным в отношении кислотности. Как и кровь, диоксид хлора высвобождает кислород, когда сталкивается с кислотностью, либо из-за молочной кислоты, либо из-за кислотности патогена. Его терапевтический эффект обусловлен, в том числе, тем, что он помогает в излечении многих видов болезней, создавая щелочную среду, одновременно устраняя мелкие кислотные возбудители, по-моему, путем окисления, при невозможности электромагнитной перегрузки. рассеиваться одноклеточными организмами.

Многоклеточная ткань обладает способностью рассеивать этот заряд и не подвергается такому же воздействию.

Биохимия, в свою очередь, определяет защиту клеток посредством сероводородных групп. Диоксид хлора, который является вторым самым сильным дезинфицирующим средством после озона, гораздо более показан для терапевтического использования, поскольку он также способен проникать и уничтожать биопленку, чего не делает озон. Большим преимуществом терапевтического применения диоксида хлора является невозможность устойчивости бактерий к ClO2. Диоксид хлора является селективным окислителем и в отличие от других веществ не вступает в реакцию с большинством компонентов живой ткани. Диоксид хлора быстро реагирует с фенолами и тиролами, необходимыми для жизни бактерий. В фенолах механизм заключается в воздействии на бензольное кольцо, устраняя запах, вкус и другие промежуточные соединения. Диоксид хлора эффективно удаляет вирусы и до 10 раз эффективнее Оценка противовирусной активности диоксида хлора в отношении калицивируса кошек, вируса гриппа человека, вируса кори, вируса чумы плотоядных, вируса герпеса человека, аденовируса человека, аденовируса собак и парвовируса собак.Он также оказался очень эффективным против мелких паразитов, простейших.

Предметом большой озабоченности медицинских работников с точки зрения медицины является реактивность диоксида хлора с незаменимыми аминокислотами. В некоторых тестах на реакционную способность диоксида хлора с 21 незаменимой аминокислотой только цистеин, триптофан и тирозин, пролин и гидроксипролин реагировали при рН около 6. Эти аминокислоты относительно легко заменить.

Цистеин и метионин.Окисление диоксидом хлора производных метионина и цистеина до сульфоксида. Это две ароматические аминокислоты, содержащие сульфид, триптофан и тирозин, а также 2 неорганических иона FE2 + и Mn2 +. Цистеин, благодаря своему членству в тиоловой группе, представляет собой аминокислоту, в 50 раз более реактивную со всеми микробными системами, чем остальные четыре незаменимые аминокислоты, и поэтому неспособную создать устойчивость к диоксиду хлора. Хотя на сегодняшний день это научно не доказано, фармакодинамика обычно предполагает, что причина его противомикробного действия связана с его реакциями на четыре аминокислоты, перечисленные выше, или на белковые и пептидные остатки.

1. Диоксид хлора представляет собой желтый газ, который легко растворяется в воде, не изменяя своей структуры.
2. Получают смешиванием хлорита натрия и разбавленной соляной кислоты.

2. Газообразный диоксид хлора, растворенный в воде, является окислителем. 3. Диоксид хлора является рН-селективным, и чем кислее патоген, тем сильнее реакция.

4. Согласно токсикологическим исследованиям EPA (Агентство по охране окружающей среды США), диоксид хлора не оставляет следов и не накапливается в организме в течение длительного времени.

5. В процессе окисления превращается в кислород и хлорид натрия (поваренная соль).

ХЛОРА ДИОКСИД И ОСНОВЫ ЕГО ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ ПРИ КОРОНАВИРУСАХ Двуокись хлора (ClO 2 ) уже более 100 лет используется для борьбы со всеми видами бактерий, вирусов и грибков. Он действует как дезинфицирующее средство, так как по своему способу действия оказывается окислителем. Это очень похоже на то, как работает наш собственный организм, например, при фагоцитозе, когда процесс окисления используется для устранения всех видов патогенов.Диоксид хлора (ClO 2 ) представляет собой газ желтоватого цвета, который на сегодняшний день не внесен в обычную фармакопею в качестве активного ингредиента, хотя он в обязательном порядке используется для дезинфекции и консервирования пакетов с кровью для переливания. Он также используется в большинстве бутилированных вод, пригодных для употребления, поскольку не оставляет токсичных остатков; в дополнение к тому, что он хорошо растворим в воде и испаряется при температуре 11 ºC.

Недавняя пандемия коронавируса Covid-19 требует срочных решений с подходом со всеми возможными подходами, будь то традиционные или альтернативные.В предыдущих исследованиях диоксид хлора (ClO 2 ) в водном растворе в низких дозах уничтожал этот вирус.

Подход следующий: с одной стороны, мы знаем, что вирусы абсолютно чувствительны к окислению, и поэтому он используется в пакетах с человеческой кровью против таких вирусов, как ВИЧ, и исследования на крысах показывают, что он полностью контролирует вирусные инфекции гриппа А, он предлагается, чтобы он также действовал на SARS-Cov-2.

Базовые предложения по механизмам действия при COVID 19

1. Диоксид хлора уничтожает вирусы посредством процесса селективного окисления за очень короткое время. Он делает это путем денатурации белков капсида, а затем окисляет генетический материал вируса, выводя его из строя. Совершенно новый подход, который более тринадцати лет изучал Андреас Людвиг Калькер, один из членов этой исследовательской группы, в результате чего были получены три фармацевтических патента для парентерального применения. Он может быть произведен в любой аптеке в качестве основного препарата и использовался аналогично (DAC N-055) в старом немецком кодексе лекарственных средств как «Natrium Chlorosum» с 1990 года.

   До сих пор предлагались решения, которые приводили к чрезвычайно медленным процессам, и, учитывая скорость атаки вируса, мы должны стараться использовать самые быстрые и оперативные возможные пути. Большим преимуществом диоксида хлора является то, что он работает с любым подвидом вируса и не может быть резистентен к этому типу окисления. Не будем забывать, что это вещество использовалось в течение 100 лет в сточных водах, не вызывая никакого сопротивления.

2. Уже есть научные доказательства того, что диоксид хлора эффективен при коронавирусе SARS-CoV-2. Также было показано, что он эффективен при коронавирусе человека и у животных, таких как собаки, известный как респираторный коронавирус собак, или у кошек, включая кошачьи кишечные инфекции. коронавирус (FECV) и более известный вирус инфекционного перитонита кошек (FIPV), поскольку он денатурирует капсиды путем окисления, инактивируя вирус за короткое время.

Следует отметить, что пероральный прием диоксида хлора представляет собой совершенно новый противовирусный подход, поскольку он является окислителем и может уничтожать путем сжигания любой подвид или мутантный вариант вируса. Учитывая чрезвычайную ситуацию, в которой мы сейчас находимся с Covid-19, пероральное использование ClO2 предлагается немедленно по уже известному и используемому протоколу.

2. Токсичность. Самые большие проблемы, связанные с лекарствами в целом, связаны с их токсичностью и побочными эффектами. Новые исследования демонстрируют его жизнеспособность. Хотя токсичность диоксида хлора при массивном вдыхании известна, клинически доказанной смерти даже при высоких дозах при пероральном приеме нет. Смертельная доза (LD50, коэффициент острой токсичности) считается равной 292 мг на килограмм в течение 14 дней, где ее эквивалентом для взрослого человека весом 50 кг будет 15 000 мг введенного в течение двух недель газа, растворенного в воде (что-то почти невозможное). Используемые пероральные субтоксические дозы составляют около 50 мг, растворенных в 100 мл воды 10 раз в день, что эквивалентно 0.5 г ежедневно (и, следовательно, только 1/30 от LD50 15 г ClO2 в день).

Диоксид хлора диссоциирует, распадается в организме человека за несколько часов на незначительное количество поваренной соли (NaCL) и кислорода (O2) в организме человека. Кроме того, измерения газов венозной крови показали, что он способен существенно улучшить оксигенационную способность легких больного пациента.

ДЕЙСТВИЕ ДИОКСИДА ХЛОРА ПРОТИВ ВИРУСОВ Как правило, большинство вирусов ведут себя одинаково, и как только они связываются с соответствующим типом хозяина — бактерией или клеткой, в зависимости от обстоятельств, — компонент нуклеиновой кислоты, который вводит вирус, вступает во владение после процессов синтеза белка в организме. зараженную клетку.Определенные сегменты вирусной нуклеиновой кислоты отвечают за репликацию генетического материала капсида. В присутствии этих нуклеиновых кислот молекула CLO2 становится нестабильной и диссоциирует, высвобождая образовавшийся кислород в среду, что, в свою очередь, способствует насыщению кислородом окружающих тканей, повышая активность митохондрий и, следовательно, реакцию иммунной системы. Нуклеиновые кислоты, ДНК-РНК, состоят из цепочки пуриновых и пиримидиновых оснований, см.: гуанина (Г), цитозина (Ц), аденина (А) и тимина (Т).Именно последовательность этих четырех звеньев в цепи отличает один сегмент от другого. Основание гуанина, которое содержится как в РНК, так и в ДНК, очень чувствительно к окислению, образуя в качестве побочного продукта 8-оксогуанин. Следовательно, когда молекула CLO2 вступает в контакт с гуанином и окисляет его, это приводит к образованию 8-оксогуанина, что блокирует репликацию вирусной нуклеиновой кислоты путем спаривания оснований. Хотя репликация белкового капсида может продолжаться; Образование полнофункционального вируса блокируется окислением благодаря CLO2.

Молекула CLO2 обладает характеристиками, которые делают ее идеальным кандидатом для лечения в клинических условиях, поскольку это продукт с высокой способностью к селективному окислению и большой способностью уменьшать ацидоз, повышая содержание кислорода в тканях и митохондриях, тем самым способствуя быстрому выздоровление больных с заболеваниями легких.

ВОЗМОЖНЫЕ МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ Диоксид хлора вступает в реакцию с антиоксидантами и различными кислотами, поэтому во время лечения не рекомендуется применение витамина С или аскорбиновой кислоты, так как это сводит на нет эффективность диоксида хлора в элиминации болезнетворных микроорганизмов (антиоксидантное действие одного предотвращает избирательное окисление другого.) Поэтому не желательно принимать антиоксиданты в дни лечения. Было показано, что желудочная кислота не влияет на его эффективность. У пациентов, получающих лечение варфарином, им следует постоянно проверять значения, чтобы избежать случаев передозировки, поскольку было показано, что диоксид хлора улучшает кровоток. Хотя диоксид хлора очень хорошо растворим в воде, его преимущество заключается в том, что он не гидролизуется, поэтому не образует токсичных канцерогенных ТГМ (тригалометаны), таких как хлор. Он также не вызывает генетических мутаций или пороков развития.

ГИПОТЕЗА Пероральное введение диоксида хлора устраняет инфекцию COVID 19. МЕТОДОЛОГИЯ ТИП ИССЛЕДОВАНИЯ Обсервационное, проспективное, квазиэкспериментальное исследование группы случаев. Характеристики нашего исследования: как и квазиэкспериментальные исследования, оно используется, в частности, для определения эффекта лечения или вмешательств. Он имеет две основные характеристики: во-первых, не требует процедуры рандомизации для формирования основной и контрольной групп; второй может иметь или не иметь контрольные группы.Это квазиэкспериментальное исследование предлагает адекватный уровень внутренней и внешней валидности. Кроме того, мы будем использовать временные ряды без контрольной группы, на основе одной группы, выполняющей функции изучения и контроля. После того, как она установлена, проводятся периодические измерения зависимой переменной, затем применяется обработка, и впоследствии зависимая переменная продолжает периодически измеряться.

Деформация зародышевого листка и формирование оси в агрегатах эмбриональных клеток морских актиний

Эмбриональное развитие животных можно рассматривать как устойчивую серию морфогенетических событий, запускаемых и контролируемых действием регуляторных молекул и физическими характеристиками клеток и тканей.Эти морфогенетические события образуют траекторию развития, позволяющую сформировать определенный план тела. Поразительно, что специфический для данного типа план тела может быть достигнут различными траекториями развития. Например, у хордовых радиальное голобластическое дробление бедных желтком яиц головохордовых Branchiostoma приводит к образованию полой целомобластулы, которая гаструлирует путем инвагинации. Напротив, дискоидальное дробление птичьего яйца приводит к образованию дискобластулы, лежащей поверх желтка и гаструлирующей за счет ингрессии одиночных клеток через первичную полоску (1). Несмотря на это, обе траектории развития ведут к формированию типичного плана строения хордовых. Точно так же среди различных кишечнополостных можно обнаружить практически все известные способы гаструляции (2). В то время как инвагинация преобладает среди антозоев и сцифозоев, гидрозои гаструлируют путем униполярной или мультиполярной ингрессии, деламинации или эпиболии. Тем не менее, после гаструляции все книдарии (за исключением нескольких прямых разработчиков) образуют типичную личинку-планулу. Как такие различия в развитии развивались и как они могли способствовать формированию различных планов тела, остаются открытыми вопросами в биологии.

Большое количество экспериментальных данных указывает на то, что спектр способностей к дифференцировке и клеточному поведению в эмбриональных клетках шире, чем их предполагаемая судьба и фактическое поведение во время нормального развития (3⇓⇓⇓–7). Крайний случай пластичности развития наблюдается у животных, способных развиваться из скопления диссоциированных и реагрегированных клеток, когда первоначальный план тела разрушается, а затем восстанавливается de novo путем самоорганизации (8⇓⇓–11). Мы пришли к выводу, что новые траектории развития могут развиваться, когда клетки, способные к регулятивному развитию, реагируют на новые физические ограничения, такие как увеличение количества желтка в вышеупомянутом примере.Поэтому мы предположили, что новые траектории развития могут также использоваться, если эмбриональные клетки сталкиваются с новым контекстом в экспериментальной ситуации. Чтобы проверить степень регулирующей способности эмбриональных клеток, мы провели эксперименты по диссоциации-реагрегации с эмбрионами морского анемона Nematostella vectensis . В этом исследовании мы используем комбинацию анализов микрохирургии и трансгенных репортерных генов для оценки потенциала развития различных эмбриональных клеток, происходящих из диссоциированных гаструл Nematostella , и анализа процесса реформирования осей тела и зародышевых слоев.

Результаты и обсуждение

Nematostella представляет собой книдариальную модельную систему, поддающуюся функциональным исследованиям в эмбриогенезе. После оплодотворения эмбрион Nematostella развивается в полую бластулу, которая затем гаструлирует путем инвагинации, формирует личинку плавающей планулы и метаморфозирует в первичный полип (12). Недавние эксперименты по трансплантации показали, что губа бластопора гаструлы Nematostella обладает способностью индуцировать ось, передающейся Wnt1 и Wnt3 , сходной с бластопоральным осевым организатором позвоночных (13, 14).Чтобы оценить потенциал развития различных эмбриональных клеток, мы диссоциировали Nematostella midgastrulae на стадии, когда энтодерма только начинает инвагинировать, на одиночные клетки или небольшие кластеры из двух-девяти клеток [~80 и ~20% соответственно (рис. .S1 A )] и реагрегировали их центрифугированием (рис. 1 A ). Сразу после центрифугирования в агрегатах отсутствовали какие-либо признаки осевой полярности или сегрегации зародышевого слоя как на морфологическом (рис. 1 B и C ), так и на молекулярном (рис. S2 A – T ) уровень. Полнота диссоциации и последующие морфологические наблюдения были подтверждены анализом гибридизации in situ оральных маркеров Wnt1 , Wnt3 , Wnt4 , Bra и FoxA , маркера среднего тела 3 Wnt2 , FGFa1 , энтодермальный маркер SnailA и маркеры направляющей оси BMP2/4 и Chordin через 30 мин после диссоциации (mpd, т.е., сразу после реагрегации) до 6 дней после диссоциации (dpd) (рис. S2). Слои эктодермальных и энтодермальных клеток начали разделяться на несколько независимых областей через 6-12 ч после диссоциации (hpd) (Fig. 1 D и E ). Первым формировался эктодермальный клеточный слой, а энтодерма оставалась неэпителизированной. К 24 часам в сутки сегрегация зародышевого слоя была завершена (рис. 1 F и G ), а энтодермальный маркер snailA экспрессировался исключительно во внутреннем слое агрегатов (рис. S2 B ′). На этом же этапе мы наблюдали первые признаки формирования рта (рис. 1 H ). Начиная со 2-х суток после диссоциации, агрегаты были наиболее похожи на планулы: их эктодерма развивала реснички, агрегаты активно плавали. Интересно, что более крупные агрегаты выглядели так, как будто они были построены из нескольких сросшихся планул. Формирование рта и глотки продолжалось в течение следующих 2 сут (рис. 1 I – К ), а к 6 суткам развились гипостомы (ротовые конусы) (рис.1 L ). Формирование щупалец завершалось к 7–10 суткам (рис. 1 M ). В зависимости от размера агрегата образовывались одно или несколько ротовых отверстий. Чтобы отслеживать формирование орально-аборальных осей в агрегатах, мы провели двойную гибридизацию in situ с маркером орального полюса FoxA и маркером аборального полюса FGFa1 (15) (рис. 1 N ). Интересно, что количество пятен, экспрессирующих FoxA , превышает количество пятен, экспрессирующих FGFa1 , примерно в 3 раза (в среднем: 2. 98; 95% доверительный интервал: 2,69–3,27; медиана: 3,0; n = 60). Крупные агрегаты всегда образовывали несколько голов с разным количеством щупалец (рис. 1 O – S ). В отличие от агрегатов взрослого пресноводного полипа Hydra (16), ротовые отверстия часто располагались очень близко друг к другу (рис. 1 S и T ), что свидетельствует о том, что латеральное торможение не столь выражено, как у Hydra. .